白血球算定法

1. マイクロピぺット等を用いて希釈液(チュルク液等)を9、次に検体液を1の割合で試験菅に入れ、10倍希釈液を作ります。この時、チップ外側に付着した血液を清浄綿等できれいにふき取った後、チップ先端を希釈液に入れて数回ピペッティングを行い、検体液の分量を正確に希釈液に入れるようにします。1回の算定で使用する液量は、計算室1面当たり約90μLです(操作にともなうロス分は含んでいません)。
2. ミキサー等で攪拌した後、数分問静置して赤血球の溶血を待ちます。
3. 再度よく攪拌して細胞分布を均一にした後、この希釈液をマイクロピペット等に採ります。
4. 裏面取扱説明書記載の操作方法にしたがい希釈液を計算室に入れ、保湿したシャーレの中に10分程度静置して白血球の沈下を待ちます。つぎに計算盤をステージにセットし、100倍顕微鏡下で白血球をカウン トします。
5. 図-5のように、はじめに上段グリッドの左端に焦点をあわせ、右方向へ移動しながら上段3グリッド内にある白血球をカウントします。こうして一度に3グリッド分ずつ計数しながら、図-5の矢印の順序で40グリッド内にあるすぺての白血球をカウントします(中間目印として、20グリッド目に3重線があります)。また、境界線上にある白血球は、重複を避けるため、図-5のように相対する辺いずれか一方の線上にある物だけを数えます。
6. 以上により求めた細胞総数をxとすると、検体原液1mL中の細胞数Xは、X=x/50(計算室容量)×10(希釈倍率)×1,000=200x
   ●Xを1,000で割ると1μLあたり白血球数になります
   ●希釈を行わない時は希釈倍率の数字を1にします

以上の算定を2つの計算室で同時に行い、その平均値を出すとより正確な算定結果が得られます。